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赵高趁机进谗言说：“这样就危险了，沙丘之谋，丞相参与了。
现在陛下已经立为皇帝，可是丞相并没有更加尊贵，这样就表明他内心也想割地封王了！
而且陛下不问我，我也不敢说。
丞相的儿子李由担任三川郡守，楚地盗贼陈胜等人都是丞相邻县的居民，所以当陈胜等人经过三川郡时，李由只是守城，却不出击。
我听说他们之间有书信往来，因为还没有得到确切情况，所以不敢来告知陛下，况且丞相处在宫外，权势比陛下还重。”
秦二世听罢立即派人去调查李由与陈胜起义军的关系，李斯意识到大祸将至，立即上书二世，揭发赵高的罪错，建议除掉赵高。
秦二世对赵高深信不疑，以为李斯是诬告赵高，离间君臣关系，他还把李斯上书的内容告诉了赵高。
赵高立即先发制人，对秦二世说：“丞相所忧虑的只有我赵高，我死后，丞相就要仿效田常篡夺君位了！”
秦二世于是下令逮捕李斯，说：“那就把李斯交给郎中令处理吧！”
李斯被抓了起来，关进了监狱。
与李斯一起下狱的，还有右丞相冯长疾和将军冯劫。
二冯认为“将相不能受侮辱”
，就自杀了。
秦二世令赵高审讯李斯，赵高刑讯逼供，让李斯承认谋反之罪，并将其宗族通通收捕殆尽。
李斯经不住酷刑的折磨，承认了赵高的指控。
李斯之所以不自杀，是因为自负能言善辩，有功劳，确实没有谋反的动机。
他在狱中向二世上书，在书中竭尽其辩才，希望二世省悟而赦免自己。
但是，赵高却扣下了李斯所上之书。
赵高又令人假扮御史等官员，反复审讯李斯。
只要李斯稍有翻案的念头，就加以严刑拷打，迫使李斯维持承认谋反的口供。
最后，二世派人向李斯验证口供，李斯以为又同前几次一样，终于不敢改变口供，承认了状辞。
秦二世二年（公元前208年）七月，李斯在咸阳市被当众腰斩，其宗族也被全部诛灭。
李斯的一生，颇能发人深思：他在辅佐秦始皇统一天下，建立大一统君主专制帝国的过程中，作出了一定的贡献，是秦始皇身边几个具有政治见解的大臣之一。
但他贪图爵禄，缺乏气节，在专制政治的漩涡中，不敢坚持自己的见解，甘愿与昏君同流合污。
最后，不仅毁掉了自己的前半生功业，还在权力的角逐中丧生。
他既是被专制政治和昏君奸佞所杀，也是为自己丧失节操所害。
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